作者：林晓静，邹飞，李亚洁，王斌，韩雪琳，贺文静

【关键词】 急性肺损伤

Aggravating effect of hyperthermia on lipopolysaccharidemediated ALI/ARDS in rats

　　【Abstract】 AIM: To observe the effect of hyperthermia on lipopolysaccharide (LPS)mediated ALI/ARDS in rats. METHODS: Male specificpathogen free Wistar rats were randomly assigned to the following groups: salineinjected normothermic control (CGroup), salineinjected heat exposed (HGroup), LPSinjected normothermic control (LGroup) and LPSinjected heat exposed (HLGroup). Rectal temperature (Tr) was continually monitored. Plasma levels of TNFα and IL6, arterial blood gas, lung wettodry weight ratio (W/D), and lung histological change were observed at 0, 40, 80 and 120 min. RESULTS: ① The rats in HLGroup displayed significantly higher values of Tr (43.04±0.11) ℃ compared with C/LGroup （P<0.01）. There was no significant difference between HLGroup and HGroup （P>0.05）. ② Significant elevations of the peak TNFα level (at 80 min) and IL6 expression were seen in HLGroup （P<0.01）. ③ The values of HCO3 and PaCO2 significantly decreased at 40 min in HLGroup（P<0.01）. At 120 min, the values of HCO3 and PaCO2 decreased to (10.42±1.06) mmol/L and (2.82±0.81) kPa respectively. ④ Significantly increased W/D ratio and many pathological features of acute microvascular lung injury were seen in HLGroup. CONCLUSION: Hyperthermia may aggravate ALI/ARDS in LPSinjected rats.

　　【Keywords】 hyperthermia; LPS; ALI/ARDS; rats

　　【摘要】 目的： 研究过热对脂多糖（LPS）介导的大鼠急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征（ALI/ARDS）的影响. 方法： 雄性SPF级Wistar大鼠随机分为： 常温生理盐水组（C组），高温生理盐水组（H组），常温脂多糖组（L组），高温脂多糖组（HL组）. 持续描计动物直肠温度（Tr），并检测动物应激0， 40， 80， 120 min时血浆TNFα， IL6含量，动脉血气，血浆肺湿质量/干质量比值（W/D）以及肺病理改变. 结果： ① HL组Tr上升到（43.04±0.11）℃，与C组，L组之间存在显著性差异（P<0.01），与H组之间不存在显著性差异（P>0.05）；② HL组动物血浆TNFα峰值（80 min）及 IL6表达水平显著升高（P<0.01）；③ HL组HCO3-，PaCO2于致伤40 min时即出现显著下降（P<0.01），致伤120 min时分别为（10.42±1.06） mmol/L， （2.82±0.81） kPa；④ HL组动物W/D显著性升高（P<0.05）；肺急性微血管损伤有病理学改变. 结论： 过热应激能够加重LPS介导的大鼠ALI/ARDS.

　　【关键词】 过热；脂多糖；急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征；大鼠

　　0引言

　　强烈持久的热应激可以导致机体过热，其细胞毒性以及宿主的炎症反应相互作用往往导致热应激个体发生热射病，多器官功能障碍综合征（MODS），增加临床救治以及监护难度［1］. 随着全球气候变暖以及热浪袭击频率和强度的逐年增加［2］，积极预备应对突发热损伤事件具有重要意义. 本研究探讨过热复合脂多糖诱导急性肺损伤（ALI）大鼠动脉血气，肺病理，血浆TNFα等指标的动态变化特点及其机制.

　　1材料和方法

　　1.1材料

　　仿真热气候动物舱（南方医科大学公共卫生学院提供），Powlab/8sp生理记录仪（AdInstruments公司，南方医科大学公共卫生学院提供），酶标仪（BIOLRAD公司，南方医科大学基础医学院免疫系提供），万分之一电子天平. LPS（E coli，0111:B4, 批号： 034K4105，购自德国SigmaAldrich公司）. SPF级雄性Wistar大鼠80只（使用实验动物质量合格证编号： 0005277，南方医科大学实验动物中心提供），体质量190~210 g，随机分为高温 脂多糖组（HL组），脂多糖组（L组），高温组（H组），对照组（C组），各组下设应激后0，40， 80， 120 min组（n=5）. 主要致模因素为LPS，干球温度（Tdb），应激时间，次要致模因素为相对湿度（RH），湿球温度（Twb）；实验环境： 仿真热气候动物舱.

　　1.2方法

　　实验动物以30 g/L戊巴比妥钠1 mL/kg腹腔注射麻醉后仰卧位固定于操作台，头转向一侧. 经左股动脉插管连接三通，以肝素盐水（125 u/mL） 0.2 mL/h冲管. HL组，L组经尾静脉缓慢注射LPS （1 g/L）10 mg/kg，H组，C组经尾静脉缓慢注射NaCl（9 g/L）10 mL/kg. 动物稳定10 min后置入仿真热气候动物舱行热暴露. HL组，H组暴露条件： Tdb： （35.0±0.5）℃， Twb： （27±0.5）℃；L组，C组暴露条件： Tdb：（26±0.5）℃，Twb：（21±0.5）℃. 各实验组RH均为（40±5）%. 于各时相点采集标本，放血处死动物.

　　1.2.1监测指标① 连接Powlab/8sp生理记录仪，描记直肠温度（Tr）；② 于各时相点采集股动脉血做血气分析；③ 左肺叶组织湿质量/干质量比值（W/D）： 游离大鼠左肺，称量湿质量（W），经-0.06 kPa×50℃脱水至恒重，称量干质量（D），计算W/D比值，测量肺组织含水量；④ 右肺中叶背侧组织固定，包埋，切片，HE染色后光镜下观察病理学改变；⑤ 采用固相三明治夹心，酶联免疫吸附试验检测血浆TNFα， IL6含量，具体操作参照试剂盒（RatTNFα， RatIL6试剂盒，晶美生物工程有限公司）说明书进行.

　　1.2.2实验性热射病，全身炎症反应综合征（SIRS）诊断标准实验性热射病诊断标准参考动物热射病诊断标准［3，4］，SIRS诊断参考动物SIRS诊断标准以及国际脓毒血症定义会议中有关SIRS的诊断标准［5，6］.

　　统计学处理： 数据用x±s表示，运用SPSS10.0软件包（南方医科大学基础医学院生物统计系提供）进行单因素方差分析（Oneway ANOVA），均数间多重比较采用LSDt检验法，组间方差不齐时采用非参数秩和检验.

　　2结果

　　2.1研究对象一些指标变化大鼠急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征（ALI/ARDS）Tr（Tab 1），血气分析（HCO3-, PCO2, pH， Tab 2），肺组织W/D比值（Tab 3）和血浆TNFα， IL6含量（Tab 4）均有改变.表1高温与脂多糖复合应激对大鼠直肠温度的影响（略）表2高温与脂多糖复合应激对大鼠动脉血实际碳酸氢，二氧化碳分压，pH的影响（略）/表3高温与脂多糖复合应激对大鼠肺组织湿质量/干质量比值的影响（略）表4高温与脂多糖复合应激对大鼠血浆TNFα, IL6含量的影响（略）

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